目的：
高血压病是严重危害人类健康的常见心血管病之一，也是全球范围内的重大公共卫生问题。尽管临床已有种类繁多的降压药物，但诊疗情况并不理想。因此瞄准高血压前期阶段研究高血压的发病机制并提出有效的预防和治疗手段，探索新靶点已经成为当今中国乃至世界所面临的严峻课题。我国作为食盐消耗大国，高盐饮食是构成高血压发病的重要因素之一。越来越多的研究表明TLR4　(toll　like　receptor　4，TLR4　)，NLRP3　(nod　like　receptor　with　pyrin　domain　containing　3，NLRP3)　介导的炎症反应和氧化应激与高血压密切相关。而下丘脑室旁核　(paraventricular　nucleus　of　hypothalamus，PVN)　是调控交感神经兴奋性，维持血压及心血管功能的重要核团，产生兴奋性和抑制性神经递质，起到协调自主神经和神经内分泌平衡的作用。本课题以盐诱导的高血压前期大鼠做为研究对象，通过检测PVN区TLR4、NLRP3介导的炎症反应，活性氧簇以及神经递质和血压的改变，探讨下丘脑室旁核炎症反应，氧化应激和中枢神经递质在高盐诱导高血压前期发生发展中的作用及其可能的中枢机制。
方法：
本研究采用8%的高盐　(high　salt,　HS)　饲料喂养雄性SD大鼠12w制备高血压前期动物模型。第一部分研究：NLRP3、TLR4在盐诱导高血压前期大鼠模型中表达的研究。制备高血压前期大鼠模型，验证该模型建立是否成功，同时检测TLR4和NLRP3蛋白在该模型中的表达。利用无创血压仪每周监测一次血压，共监测12w。于实验第8周、第12周处死大鼠取材，采用免疫荧光、免疫组化以及western　blotting等分子生物学技术检测下丘脑室旁核、心脏、主动脉中TLR4、NLRP3、NF-κB　(nuclear　factor-kappa　B,　NF-κB)、ASC　(apoptosis-associated　speck　like　protein,　ASC)、IL-1β　(interleukin-1β,　IL-1β)的表达情况，利用HE染色观察心脏、主动脉、脑组织的病理学改变。探讨盐诱导8w和12w时，TLR4和NLRP3在高血压前期大鼠模型中的表达情况及其与血压变化的关系；第二部分研究：中枢阻断TLR4抑制炎性因子和活性氧簇降低盐诱导高血压反应。高盐饮食诱导动物模型8w，经双侧PVN慢性给予TLR4受体拮抗TAK-242，检测平均动脉血压　(mean　arterial　blood　pressure,　MAP)，利用免疫荧光、免疫组化、western　blotting以及ELISA法检测PVN区TLR4,　Myd88　(myeloid　differentiation　factor　88,　Myd88),　NF-κB，前炎性细胞因子IL-1β，IL-6　(interleukin-6,　IL-6)，TNF-α　(tumor　necrosis　factor-α,　TNF-α)，　NADPH氧化酶NOX2　(NADPH　oxidase　2,　NOX2)，NOX4　(NADPH　oxidase　4,　NOX4)和Cu/Zn-SOD　(copper　and　zinc　superoxide　dismutase,　Cu/Zn-SOD)，以及神经调质TH　(tyrosine　hydroxylase,　TH)和GAD67　(67-kDa　isoform　of　glutamate　decarboxylase,　GAD67)的表达情况，利用DHE染色检测PVN区活性氧簇　(reactive　oxygen　species,　ROS)水平；第三部分研究：中枢阻断NLRP3调节炎性因子平衡神经递质降低盐诱导高血压反应。高盐饮食诱导动物模型4w，经双侧PVN慢性给予NLRP3受体拮抗MCC950，监测大鼠MAP，处死一组药物干预动物并取材。保留另一组药物干预大鼠，停止中枢阻断NLRP3继续高盐喂养4w，而后处死全部实验动物并取材。采用免疫荧光、免疫组化、western　blotting以及ELISA法等分子生物学方法检测PVN中NLRP3下游信号ASC、Pro-caspase-1、IL-1β，趋化因子CCL2　(chemokine　ligand　2,　CCL2),　CXCR3　(c-x-c　chemokine　receptor　type　3,　CXCR3)和粘附分子VCAM-1　(vascular　cell　adhesion　molecule　1,　VCAM-1)，促炎性细胞因子IL-6,　TNF-α,　以及神经递质GABA　(gamma-aminobutyric　acid,　GABA)和NE　(norepinephrine,　NE)的表达情况。
结果：
1.　高盐饮食4w模型组大鼠血压逐渐升高，高盐饲喂8w模型组血压显著高于对照组，且血压呈持续上升趋势，但高盐8w与12w模型组血压无显著差异，而模型组大鼠体重刚好相反呈持续下降趋势。
2.　高盐8w与12w模型组大鼠PVN区TLR4、NLRP3、NF-κB、ASC、IL-1β表达显著高于对照组，皮层、海马区发现大量活化的小胶质细胞，HE结果显示高盐12w大鼠心肌细胞核较对照组显著增大，提示早期心肌肥大。
3.　中枢阻断TLR4信号显著降低平均动脉压。PVN区TLR4下游信号Myd88、NF-κB、IL-1β和前炎性细胞因子TNF-α、IL-6水平，以及ROS，NOX2，NOX4　表达下降,　同时增加　Cu/Zn　SOD水平,　平衡兴奋性和抑制性神经递质NE和GABA水平。
4.　中枢阻断NLRP3信号显著降低动脉血压。PVN区NLRP3下游信号ASC，Pro-caspase-1，IL-1β和前炎性细胞因子TNF-α，IL-6水平，以及趋化因子CCL2,　CXCR3和粘附分子VCAM-1表达显著降低，平衡兴奋性和抑制性神经递质NE和GABA水平。　
结论：
在高盐诱导高血压前期模型中，下丘脑室旁核TLR4、NLRP3信号被激活引起中枢炎症反应。双侧PVN阻断TLR4、NLRP3信号调节炎症微环境，抑制活性氧簇以及平衡神经递质降低盐诱导高血压前期反应。