研究背景：皮肤最主要的功能是形成有效屏障抵御外界的侵害，维持体内环境的稳定。如果屏障功能破坏则会引起一系列肌肤问题。维甲酸类药物具有调节细胞增殖分化、淡化色斑，延缓衰老的功能，在角化异常性疾病治疗及皮肤美容方面发挥重要的功能。然而，在临床使用中发现，维甲酸类药物会导致皮肤发红、干燥、脱屑等刺激性反应，上述反应直接原因来自皮肤屏障的损伤，导致维甲酸在临床中使用受限制。烟酰胺属于水溶性B组维生素（VB3），研究发现烟酰胺通过增加表皮脂质、角质蛋白、丝聚合蛋白的产生，抑制炎症性细胞因子，来增强皮肤的屏障功能。如能揭示二者对皮肤屏障功能影响的机制将对临床应用烟酰胺对抗维甲酸的副反应具有重要意义。研究目的：明确维甲酸及烟酰胺对表皮屏障形态及功能的影响，以及二者相互作用可能的分子机制及作用靶向。研究方法：首先通过外用维甲酸及烟酰胺作用于小鼠皮肤，从表观、组织结构及电镜观察研究维甲酸及烟酰胺外用对小鼠表皮的形态学影响；其次采用人永生化角质形成细胞系(HaCaT)的培养，依据干预方式的不同将HaCaT细胞分3组：正常对照组（不含有任何干预措施）、维甲酸组（1x10-5mol/L　维甲酸）、维甲酸+烟酰胺组（1x10-4mol/L烟酰胺和1x10-5mol/L　维甲酸）,作用36小时后，收集细胞进行基因表达谱芯片检测和透射电镜观察，并从表达差异基因中筛选出与皮肤屏障相关的候选基因作为靶向基因，采用普通RealtimePCR　的方法在培养细胞中检测靶向基因mRNA的表达量,分别从形态学和核酸水平上对基因芯片结果进行验证。研究结果：1.　维甲酸及烟酰胺作用小鼠皮肤后表皮形态学研究：1）小鼠皮肤改变维甲酸组和联合烟酰胺组3天后小鼠背部皮肤开始发红，5天后红斑更加明显，而烟酰胺组未见异常。2）HE染色观察与基质对照组相比外用维甲酸后小鼠表皮出现角化不全，细胞间水肿；加入烟酰胺后仅见基底细胞轻度细胞间水肿。而单用烟酰胺组表皮基本正常。　3）透射电镜观察维甲酸组与基质对照组相比角质层破坏，部分区域角质层消失，颗粒层和棘层细胞间隙明显增宽，细胞间桥粒连接减少、消失，结构紊乱。而维甲酸+烟酰胺组表皮基本完整，棘细胞间隙轻度增宽，结构好于维甲酸组；单用烟酰胺与基质对照组相比结构基本正常。2.　维甲酸及烟酰胺对HaCaT细胞超微结构的影响维甲酸组与对照组相比细胞轻度水肿、体积增大，核畸形，出现脂滴、空泡化，胞质中张力微丝减少；而维甲酸+烟酰胺组细胞结构基本正常。3.　基因表达谱差异分析1）基因芯片结果分析从基因芯片结果中筛选出针对表皮屏障相关连接分子CDH5（钙粘蛋白5），TJP3（紧密连接蛋白3），CLDN4（水闸蛋白4），GJB4（缝隙连接蛋白）作为靶基因。2）靶向基因验证实验：药物干预HaCaT细胞36h后，同空白对照组比较维甲酸组CDH5，TJP3，CLDN4，GJB4mRNA水平明显高于对照组(P